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　　泛亚电竞她的作品一直以现实题材取胜。但当下现实题材到了一个井喷的时期，不要在热门中寻找冷门，在冷门中找到热门，要从题材中找切入点。此番涉足“姐弟恋”题材，她坦言是受某相亲节目的启发，“节目里的男孩子说‘我要找姐姐’，女孩子则说‘我不介意比我小的’，那么我问年龄差距幅度是多少，他们说不能超过12岁，这个尺度让我很惊讶！”

　　“姐弟恋”成了她又一个题材的切入口，但也要有独特的视角才会让观众保持新鲜感。除了那次节目给予她的启示外，生活中朋友们的亲身经历也带给她感悟。“现在生活变宽泛了，以前是‘女大三抱金砖’，现在是大年龄跨度的姐弟恋，在我们身边时有发生。”

　　于是她开始写剧本，写了一个曾经沧桑的女人，遇见一个年轻男孩子的过程。写的是美好的姐弟恋，开花结果的那种。“这也是我对爱情的理解，真诚的爱情应该有好的结果。尽管，人生有种种不如意。但是，无论如何，我们都相信爱情，一直是。”

　　事实上，在爱情剧花样翻新的当今影视圈，“姐弟恋”早已是被编剧们打磨得非常成熟的题材了。为了追求剧情上的跌宕和心理上的反差，韩剧的编剧甚至可以设置成将近20岁的巨大年龄差，为广大未婚大龄女青年注入一针梦幻强心剂。对于这点，王丽萍有自己的理解 “其实，这也是给男人造梦，可以追求比自己年长很多的。但我们的剧要有自己的风格，不雷人，更不刻意制造矛盾，一切都是真情实感”。

　　在现实生活中，“姐弟恋”的压力是很大的。剧中的鲍家明和于小强的爱情开始也不被家里看好，鲍家明的父母更是强烈反对儿子和这个比自己大六岁，还离过一次婚的女生在一起。不过，最大的压力其实还是来源于当事人自身的。 “年龄跨度越大，容貌差异也越大，而外貌又是女性心中最大的心结。我觉得，姐弟恋的男女，都是非常强悍的。”也许是为了阐释自己的这一理念，王丽萍起用了闫妮和胡歌这一“御姐”与“萌男”的别样组合。从以往的角色戏路来看，这两人出现在同一屏幕上或许会有些违和感，但编剧却不这么认为，“我们就要给观众这个效果，一开始就是不可能的，姐弟恋是在共同的磨炼中产生的一种爱情”。

　　刚刚走出《一仆二主》中女追男的疯狂戏码，又在《生活启示录》中上演了“姐弟恋”的真情告白，近期荧屏上的闫妮有点忙。

　　选择闫妮出演，王丽萍认定她是不二人选。“她有过类似的经历”。 在她眼中，闫妮身上有一种让你说不清楚的吸引力，让男人看了很喜欢，女人见了也不嫉妒，因此她认为只有她演这样的姐弟恋才会让观众信服，才能明白这样一个女人为什么会被这么多好男人喜爱。

　　剧情是非常接地气的，但是闫妮与胡歌的演绎却是“青春偶像剧”式的。不仅有激吻，甚至还有激情戏。编剧王丽萍表示，这个故事是与闫妮讨论出来的，剧中有不少闫妮自己的爱情观，她自己并不排斥姐弟恋。两人早早便定下合作事宜，当时闫妮就觉得男主角“非胡歌莫属”。

　　对其在剧中表现，编剧也给予了充分的肯定。“她有爆发力，还敢演。她的表演却是完全不贴标签的。从发现老公搞外遇时负气出走的倔强，到宽待小三并尽力帮助的厚道，再到面对鲍家明的爱情攻势时时装傻充愣的被动，于小强的人物形象显得非常鲜明而又浑然天成。”

　　怀着对爱情的无比坚定鲍家明对于小强发动猛烈的爱情攻势，还大胆接受了于小强和前夫的孩子，勇敢担当照顾孩子的责任。这种满满的爱情正能量，不仅是为大龄剩女们造梦，也呈现了爱情本身包含的无限可能。“不管是姐弟恋，还是任何一种什么样的恋情，只要是真实的恋情，双方都是会被互相带动，有一种爱情、激情，很闪光的，很让人享受。”

　　“今年是我入行的第10个年头，我想有些突破，想在30岁以后演一些扎实的题材和角色，演一些符合这个年龄段的角色。如果再演以往那些根据游戏和小说改编的古装魔幻题材，对自己来说是往回走了。很幸运的是，我有了这样的想法就立马得到了实现，王丽萍老师就找到了我，让我出演《生活启示录》。”

　　多以英俊少年形象示人的偶像胡歌，此次在剧中卸掉了古装偶像光环，与大龄失婚女大谈“姐弟恋”，在生活剧中演绎生活，实实在在接了一把地气。

　　出演这样的角色，胡歌无疑是尝试了一次“落地”的转型之举。他表示，“我已经过了出演美少年的阶段了。而且老妈也希望我演一些能给她看的戏。接演这部戏之前，我演了一年的话剧。这次以最为自然松弛的状态‘落地’，演完之后也更为自信了”。

　　而曾经的生活经历也让他在诠释鲍家明这个人物时，带上了更多的创作激情：“这8年（受伤至今）的生活经历带给我很多体验和感悟，可以说，剧中鲍家明那种打不垮的精神是我能感同身受的。”今年是他入行的第10个年头，碰到了鲍家明这个角色，表演之路走了一个圈，他认为自己是时候重新出发了。

　　“这个人物是有责任有担当的。”于小强发现自己怀上了前夫的孩子，正当她不知所措的时候鲍家明勇敢地站出来表示自己愿意承担父亲的责任，成了称职的“超级奶爸”，亲力亲为地照顾孩子的饮食起居，完全一副年轻爸爸的模样。对此，胡歌笑称这次“喜当爹”的经历对他而言又是另一番有趣的体验。出演此剧，不仅要有极具亲和力的外表，更重要的是有一颗喜欢孩子的线岁之前要极尽疯狂：看一场超赞的演唱会；有一场说走就走的旅行；有一个随时可以甩脸给他的异性死党；在影院里大哭；一个high到爆通宵；酩酊大醉一次；谈一场疯狂却无果的恋爱。25岁之后要岁月静好：敬养父母，烹调打扫，工作读书，结婚育子，收起棱角，藏起疯癫，安稳生活。

　　这世界上最强大的人，就是那些能一个人孤单生活的人。我那些曾经最亲密的伙伴们，好久不见了。现在，你们已经不再是我触手可及的伙伴了。但却依旧相信着，那时的我们，都是彼此生命中的一道光线。最近喜欢上这样的一句话：如果有天我们变陌生了，那么我就重新认识你。

　　你花六块八买个便当吃，觉得很节省，有人在路边买了七毛钱馒头吞咽后步履匆匆；你八点起床看书，觉得很勤奋，上微博发现曾经的同学八点就已经在面对繁重的工作；你周六补个课，觉得很累，打个电话才知道许多朋友都连续加班了一个月。亲爱的，你真的还不够苦，不够勤奋和努力。

　　爱情是两个人的事，错过了大家都有责任。一个人总要有个新的开始，别让过去把你栓在悲哀的殿堂。别说你最爱的是谁，人生还很长，谁也无法预知明天。好聚好散，每个人都有自己的无奈。活着不是为了怀念昨天，而是要等待希望。哭完就把一切都留在昨天，永远不要去触及。

　　“在1525年圣灵降临节期过后，在礼拜三与礼拜四之间的那个晚上，我在睡梦中看到了这番景象，巨大的水流从天而降，第一股大水就倾泻在离我大约四英里的地方，然后向各个方向分散，很快就没过了整个地面。我吓坏了，在第二股洪水还没倾泻下来之前我就被吓醒了。这洪水极大，有些落在远处，有些落在近处，好像是以同样的速度降下的。我被吓醒了，身体在颤抖，很久没能回过神来。早上起来以后，我把整个画面都画下来。希望上帝不要让这一切发生。”

　　《启示录》一般收录在《新约》的最后一部分，因为语言晦涩难懂，叙述的超现实性，并不如圣经其他内容受人关注。“耶稣基督的启示，就是神赐给他，叫他将必要快成的事指示他的仆人。他就差遣使者，晓谕他的仆人约翰。约翰便将神的道和耶稣基督的见证，凡自己所看见的，都证明出来……”这段《启示录》开篇之语试图告诉世人犹太圣徒约翰所著及所传之言是来自耶稣基督的神旨，保障了《启示录》内容的合法性与可信度。新约年代表准确的说明了《启示录》写成于公元95年，而那个时代正是犹太人和基督徒遭遇野蛮迫害的时期，也是一个世人在不断的反抗与怀疑中求生存的苦难阶段。世人需要从“基督的得胜和他的荣耀显现”中重新获得信仰、获得迎接新天地、重新生活的勇气。可能正是因为这样的写作背景，人们对《启示录》的关注多是在苦难的年代里，宗教情感开始变得复杂激烈、生活开始变得流离失所时。

　　丢勒（1471-1528）生活在德意志历史上一个信仰摇摆、政治混乱的年代，《启示录》这组大型版画的诞生无疑与那个时代的精神形成以一种内在的关联。马克思・德沃夏克“作为精神史的美术史”研究观念告诉我们，要读懂丢勒，首先需要回望15世纪的德意志，感同身受的理解艺术家和那个时代的精神。

　　历史学家注意到“10世纪末人们认为世纪末日就在眼前的时候，以及12和13世纪新教派不断兴起的时候”[1]《启示录》中的神秘、怪诞开始受到众人的关注。而15世纪末16世纪初又是一个令人不安的年代，一位奥格斯堡编年史作家形容十五世纪的德意志是一个“充满变革与危险的”时代。首先，黑死病席卷着欧洲大陆，据史料记载，这场瘟疫夺走了2500万欧洲人的性命，占当时欧洲总人口的1/3，这场被看作是上帝对世人惩罚的瘟疫，让世人的精神处于崩溃的边缘，但是这还不是全部，无休无止的战乱与纷争，宗教末世的恐惧与不安……瘟疫、权力、政治、杀戮、宗教几乎让每个人无法逃出某种被诅咒的厄运。此时，《启示录》所描绘的毁灭性与对新世纪的幻想正符合处在无助年代人们的心理渴望。一直生活在北方恶劣生存环境与贫瘠土地上的德意志人民，此时的生活过得更加凄惨，人们也变得比以往更加疯狂，关于宗教神迹的任何传言可能都会让这些已经饱受折磨的人们走到崩溃的边缘，带着乱世被彻底毁灭迎来新世纪的幻想痛苦的生活着。然而令他们难堪的力量不仅仅来自信仰，农民们不思耕耘、平民们躁动不安、贵族们荒淫无度以及来自罗马教廷的横征暴敛和无休止的战争，这一切让饥荒和瘟疫一样有了超人的传播力，不论是乡下还是城市常年都处在一片混乱之中。

　　在这个无望的时刻，什么可以让人们得到哪怕是那么一点点的慰藉，或者说什么会引起人们的广泛关注？那就一定能让他们看到希望。奥托・本内施在《北方文艺复兴》一书中说到丢勒的版画《启示录》“……这就是福音传播者眼中的梦境，这与他们陷于迷茫状态下所看到的世界是一致的”。[2]也就是说，丢勒这组版画充分满足了圣经《启示录》中的抽象性与象征表现性，视觉化地再现了一个抽象的现实世界，他没有也“不可能超越中世纪世界末日的一般模式”。也正是因为如此，它受到了极大地欢迎并被广泛传播。正如德沃夏克所说“丢勒以挑战《圣经》经文的方式，描绘出自己心灵的视像。他设法将现实与非现实统一起来，对两者进行评价，并有能力准确的恰到好处的强调每一种图画元素”。[1]

　　创作这组版画时年轻的丢勒刚刚从意大利旅行回来，尼德兰的自然主义与意大利新的艺术标准及艺术成果似乎让他的艺术思路变得愈加自由，令人兴奋的是，他并没有完全被阿尔卑斯山以南的艺术样式所吸引，也没有困在对某种技艺的膜拜之中。从这一点来讲，丢勒向他的前辈们一样，从来没有丢失自己，也没有脱离德国艺术特有的神秘性以及向内探索的精神诉求。丢勒的通过个人判断组织出这些图画，而他的幻想立刻得到了世人的响应。作为宗教教义载体的十六幅木刻版画毫无疑问的将丢勒对现实的审视与对未来的信心淋漓尽致地表现出来。然而今天当我们欣赏这一系列版画时总是赞叹丢勒精湛的技艺却鲜有人去体会这些幻像与现实间的关联，忽略了这些图画里所蕴含的精神力量。丢勒精通宗教、哲学、数学和占星术知识，他丰富的游历经历让我们了解到他敏锐的观察力，鹿特丹的伊拉莫斯还说“丢勒能把用语言无法表达的东西转化到画纸上，甚至能表达语言本身”[3]正是这些天才艺术家所应具有的能力让丢勒对《启示录》中这些散文般的叙述做出了超常的整理，组织出前人不曾涉及的图画内容。从《圣约翰的殉难》到《拿着无底深渊钥匙的天使》，丢勒图示了一个人类历尽磨难脱离苦海的虚幻世界，用他超凡的想象力将现世与启示录里的世界连通起来，在苦难的日子里给人内心带来了一丝平静。

　　先来看看照亮“人子”的七盏明灯即“在主日所看见的基督异象”。《启示录》中的描述不过百字：“……灯台中间，有一位好像人子，身穿长衣，直垂到脚，胸间束着金带。他的头与发皆白，如白羊毛，如雪；眼目如同火焰；脚好像在炉中锻炼光明的铜；声音如同众水的声音。他右手拿着七星，从他口中出来一把两刃的利剑；面貌如同烈火放光。”先后有多少人描绘过这一场景，已没有具体的记录，但是从流传下来的图像看，丢勒并不是第一个也不是唯一一个描绘这个场景的艺术家。因为他对语言文字的个人化理解，他的这组版画《启示录》让“德国在欧洲艺术史中获得了全新的地位”。[1]版画中“驾云降临”的耶稣基督被七盏金灯台（“七灯台就是七教会”）围绕着，伸出他那孔武有力的右手控制着七颗星体（“那七星就是七个教会的使者”），坚定不移的姿态似乎传达出一种坚不可摧的信念。左手端着一本打开的书，与那握在手中的七颗星体形成了一种内在的关联，而从嘴里吐出的双刃剑毫无疑问的宣誓了一种不可抵挡的力量的存在。丢勒对《启示录》非常人的解读，以及他在图画中表现的倾向性，不仅仅暗示了一种无法避免的斗争精神，同时展示出了“两个世界之间的对峙”――充满热情、坚信理想的并最终创造出自身信仰的现实世界与权力世界之间的一种冲突。基督背后那大量的空白似乎将这一场景放置到了一个无限广袤的空间里凸显了“人子”的伟岸与“曾经死过，现在又活了，直活到永永远远的”永恒，塑造出了一位真正的“全能者”。

　　G勒对《启示录》的个人解读正是建立在中世纪人的态度和情感框架的基础上――具体和抽象的结合之上，因此可以看作是对隐义的永恒探索和对现世的关照。《启示录》组画中最受欢迎的《四骑士》最好地说明了这一点。这幅图画表现的是《启示录》第六章的内容――羔羊揭开封严的六印，丢勒将约翰所见的恐怖视像通过四骑士――“骑在马上拿着弓”“有权柄给了那骑马的”“骑在马上手里拿着天平”“骑在马上的，名字叫作死，阴府也随着他”――表现出来，让人立刻看到了“有权柄赐给他们，可以用刀剑、饥荒、瘟疫、野兽，杀害地上四分之一的人”是一种怎样的恐怖景象。在版画中三分之二的空间留给了死亡、饥饿、瘟疫、战争四位骑士和他们的铁骑，画面角落上痛苦、无望的可怜人像15世纪的德意志人一样，不断被践踏，被忽视，这些似乎展现了苦难的现实生活源头，肆虐的骑士犹如千军万马一样横扫人类世界，即使主教也无法逃脱这一厄运。画面最上方那位驾云而来的天使只是进一步让我们确定了一场血雨腥风的到来。狂奔出这个绘画空间的四骑士将会给人们带来多少恐怖，现在想来，这一点应该是丢勒与当时德意志土地上的人民最能体会的。丢勒曾“资助费里斯兰的医生乌尔西纽斯对梅毒的传播情况进行预测……”[3]在给皮尔克海默的信里写道“没有什么比这（梅毒）更让我恐惧的了，几乎每个人都被感染了，甚至有人因此丧命， [4]丢勒的游记手稿也展示了他对瘟疫的恐惧，对世人的悲悯，就是在这样一个真实残酷的世界里，丢勒如何能像阿尔卑斯山以南的艺术家一样，专心研究人类形体，像尼德兰艺术家一样专注于描绘自然。丢勒心中的激情、困惑与想象都转化到了这组版画里，不论是充满自然主义色彩的城市景观还是来自意大利范式的“大”，都体现出了两个世界的对峙。当他在尼德兰安特卫普听到路德被捕的消息后有一段记录或许更好的解释了他的精神世界：“他（指马丁・路德，作者加）曾与根本不像基督徒的罗马教皇斗争，罗马教皇试图制定严厉的人间法律，而忽视拯救，这样一来，我们用血汗换来的果实会再一次被掠夺，被的浪费，而穷苦和虚弱的人们一定会死于饥饿。对我来说，最让人心痛的就是上帝可能会让我们屈从于那些所谓的‘神父’们制定的虚假的、盲目的信条，而实际上，《圣经》里的很多地方都被这次人曲解了或根本就没有告知于众。”[4]

　　尽管丢勒是一位虔诚的教徒，但是他对世界的认识与当时意大利、尼德兰的那些人文主义者并无不同，他们都在“力图与大自然建立一种基于观察和个人经验的新关系”，[1]但是与生俱来的责任感与历史的自觉性，让丢勒在不断地观察现实与构建自我基础上更多的探索了精神领域的变化，他将自己所处时代的精神统统赋予在了图画的语言中，通过这些个人的心理视像呼应了世人心中隐秘世界的真理，为德意志百年来酝酿的宗教精神性自觉注入了一股力量。

　　[1] 德沃夏克.作为精神史的美术史[M].陈平，译.北京：北京大学出版社，2010.

　　[2] 本内施.北方文艺复兴[M].戚印平，毛羽，译.杭州：中国美术学院出版社，2001：21.

　　[3] 韦措尔特.丢勒和他的时代[M].朱艳辉，叶桂红，译.北京：北京大学出版社，2009.

　　[4] 丢勒.版画插图丢勒游记[M].彭萍，译.北京：中国人民大学出版社，2004.

　　[5] 路德维希.德国人[M].杨成绪，潘琪，译.北京：中国社会科学出版社，2010.

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　　第一次启动蓟崽崾臼欠裢意修改注册表和通过防火墙，选择“是”，接下来就等着查看QQ聊天记录吧，不过必须在QQ聊天前运行该软件，并打开软件配置里面的“启动”。而且只有聊天者退出QQ后才会生成聊天记录文件哦。

　　QQ退出之后，在主界面的工具栏中位鳌安榭础卑磁ィ出现“选择QQ目录和号码”列表，在里边选择你要查看的QQ号码，单击“确定”按钮。在界面左侧单击展开“聊天信息”项，该QQ曾与之聊天的QQ号码会显示在下方，单击相应的QQ号码，详细的聊天记录即会在右侧窗口中显示。另外，点击左侧窗口中的“系统信息”、“群组消息”、“临时消息”，还可查看这些相应的消息。如果点击“图片信息”，还能查看聊天双方相互发送了哪些图片!

　　点击主界面工具栏上的“配置”按钮进入提示界面(见图)，在“配置”中勾选“开机自动启动QQ聊天记录查看器”选项；在“启动模式”中勾选“程序隐藏模式”，这样该软件运行时不显示界面。设置软件激活热键，这样你自己可以随时通过热键调出软件主界面。你还可以设置一个软件登录密码来防止他人误按热键调出软件界面。

　　话说某一天，我的Windows出了点故障，于是重启，按F8键进入高级启动菜单，准备进入安全模式杀毒。不过奇怪的事发生了：我的F8启动菜单，全都变成了英文！虽然这并不影响使用，可心里实在是觉得别扭。

　　上网查了查，发现也有其他网友遇到过类似问题。究其原因，造成这种现象通常是因为使用了其他语言的Windows安装光盘修复系统的启动，或者是按照“先中后英”的顺序安装了多个Windows系统（启动菜单的语言将以最后安装的系统的语言为准）引起的，另外一些优化工具也可能导致这一问题。

　　Windows XP的启动菜单中英文不同步，一般与NTLDR、、BOOTFONT.BIN这三个文件有关，不同语言的Windows这几个文件也不同。而BOOTFONT.BIN实际上是字库文件，只有中文这样的双字节字符集的系统才有，英文系统是没有的泛亚电竞。

　　因此解决方法很简单：以原来的中文XP安装光盘启动系统，按R键进入故障恢复控制台，进入安装光盘“i386”目录下，执行以下命令：

　　Vista采用了全新的Boot Manager（启动管理器），所以当它出现启动菜单中英文不同步时，并不是像XP那样进行系统文件替换，而只要修改一下BCD（Vista引导配置数据库）设置就可以了。以中文版Vista的F8启动菜单显示为英文为例，具体做法如下：

　　在Vista中，单击“开始程序附件”，右击其中的“命令提示符”，选择“以管理员身份打开”启动它，然后输入并执行如下命令：

　　第一条命令将把当前运行的Vista的F8启动菜单的显示语言修改为简体中文；第二条命令将把多重启动菜单，也就是当安装有多个操作系统时，提示我们选择需要启动哪一个操作系统的选择菜单的显示语言修改为简体中文；第三条命令，将把Windows内存诊断工具的显示语言修改为简体中文。

　　Vista启动管理器（Boot Manager）的组成结构与XP的NTLDR有较大不同。除了硬盘活动分区根目录有一个叫BOOTMGR的隐含文件外，在活动分区的C:\BOOT文件夹中存在着以所有语言类型命名的若干个子文件夹（例如中文为zh-cn等），每个子文件夹都拥有一个不同语言版本的BOOTMGR.EXE.MUI文件。

　　现在使用Windows XP和Vista的朋友越来越多，由于Vista采用了全新的启动方式，双系统的用户经常会碰到各种启动故障。下面就结合常见的故障为大家介绍解决方法。为了更好地了解双系统故障产生的原因，我们先来简单了解一下双系统的启动流程：

　　4读取BCD文件，Boot Manager查找活动分区下的启动配置文件“C：\BOOT\BCD”，读取BCD信息然后列出启动菜单(也就是双系统启动菜单)。

　　从上面的启动流程可以看到，只要流程中的任何一个环节出现问题都会引发双系统启动故障。祖国的传统医学看病讲究“望”、“闻”、“问”、“切”，其实这同样适用于启动故障的解决，下面我们就根据故障具体症状，通过“望”(查看屏幕的错误提示)、“问”(询问故障产生前的操作)、“切”(根据故障找解决方法)来为故障把脉治疗。由于故障无色无味，“闻”就免了。

　　望：一台电脑开机自检后屏幕出现“No boot device available”(无可用的引导设备)的提示。

　　问：经过询问，原来电脑在出现故障前，杀毒软件就报警发现病毒，但是杀毒软件提示要重新启动电脑才能删除病毒，重启后出现上述故障。

　　切：从使用者描述可以知道，这个启动故障主要是病毒引发的。从启动流程来看，故障出现在“2查找活动主分区并读取Boot Sector”这步。主要原因就是硬盘活动分区丢失，或者主引导破坏。开出的药方是重新激活分区或者修复主引导记录。这里可以使用本刊2007年第18期34页介绍的PE。

　　重启电脑，将第一启动设置为光盘启动并引导到PE后，单击“Starts磁盘工具MBRWhisky”。启动程序后，在HDD(硬盘列表)选择当前硬盘，选中本机的第一分区，接着单击“Partitionset active/bootable”(分区设置活动/可启动分区)，把当前分区重新激活。如果是主引导记录破坏，则单击“diskrepairxp/2000/pe”(磁盘修复XP/2000/PE)，修复主引导记录。

　　注意：重写主引导记录是很危险的操作，更改之前强烈建议单击“disksave mbr to file”(磁盘保存MBR数据到文件)，备份当前系统的主引导记录，以便出现错误后恢复。

　　问：经过询问，原来电脑主人前面安装了XP并做了Ghost备份，后来安装Vista组成双系统，使用Ghost还原系统后出现上述故障。

　　切：由于前面GHO备份没有包含BOOTMGR和BCD启动文件，导致恢复后Vista无法启动。从启动流程来看，故障出现在“3加载BOOTMGR”这步，原因是无法加载启动管理器(因为根本没有该文件)。开出的药方是在XP中重建BCD，添加Vista启动信息。

　　同上，先使用安装光盘进入PE，把光盘上的“BOOTMGR”文件复制到C：\，接着选择自动修复，系统会自动生成启动菜单并可以进入Vista。此外，预装Vista的品牌机上再安装XP也经常出现上述故障(不同的是引导分区已经有BOOTMGR和c：\boot文件夹)。因此，为了避免上述故障的出现，双系统用户应该在安装好双系统后再备份C盘。如果没有Vista安装光盘，可以在恢复系统前备份“C：\BOOTMGR”文件和整个“C：\boot”文件夹。恢复XP后把上述备份文件复制到V：\，并在命令提示符输入“x：\boot\bootsect-nt60c：”(x：为Vista光盘的盘符，使用该命令更改系统盘引导方式)即可重现双启动菜单。

　　问：经过询问，原来电脑主人使用Easybcd编辑过启动配置文件BCD，重启后出现上述故障。

　　切：Vista的启动配置信息全部保存在“C：\boot\bcd”中，如果对BCD文件进行错误编辑，或者BCD文件受损，系统无法读取XP(NTLDR)和Vista(winload.exe)启动文件，导致上述故障产生。从启动流程来看，故障出现在“4读取BCD文件和5.选择系统”。因为，虽然可以读取BCD启动菜单信息，但是由于启动配置信息损坏，导致选择XP或Vista后，读取启动文件(NTLDR、BOOTMGR)出错。开出的药方是重新编辑或者重建BCD文件。

　　由于手动编辑BCD操作比较复杂，这里可以借助Vista安装光盘提供的自动修复功能。使用Vista安装光盘启动后，在出现安装界面时单击左下角的“修复计算机”。PE会自动检测到本机出现引导故障，我们只要按提示单击“修复并重新启动”，PE会自动修复故障。重启后可以进入Vista，然后在Vista下进行修复，具体操作在下面“XP无法启动，但可以进入Vista”部分介绍。

　　望：有启动菜单出现，但是只能启动ViSta，选择XP时提示“找不到\NTLDR文件”(但是NTLDR仍然在C：\)。进入Vista执行“BCDEDIT.exe”后，可以发现BCD中XP启动项中没有启动分区(device标识为unknown)。

　　切：根据描述，可以判断故障的原因是由于断电导致的BCD文件错误，从启动流程来看，故障出现的流程步骤和上例类似(不同的是，该例可以正确读取Vista启动信息并成功引导)。由于系统文件并没有受损，我们可以进入vista使用BCDEDIT命令添加XP的启动信息。

　　进入Vista后，以系统管理员身份启动cmd.exe，接着输入下列命令添加XP的启动文件，完成后可以输入“BCDEDIT”查看成功添加启动项：

　　Runx3（PEBP2αC/CBFA3/AML2）基因是一个肿瘤抑制基因，其功能缺失与多种恶性肿瘤的发生发展有关。自2002年日本学者Li等［1］首先报道Runx3有调节胃上皮细胞的增生与凋亡平衡的作用以来，Runx3与胃癌发生、发展的相关研究已成为胃癌研究领域的热点。现对Runx3与胃癌的研究现状做一综述。

　　Runx3来自Runt结构域转录因子（Runtdomaintranscriptionfactors），是转录因子Runx家族成员之一，Runt区域转录因子也称PEBP2/CBF（polyomavirusenhancer-corebindingprotein2/corebindingfactor），是TGF-β超家族信号重要的靶目标，在哺乳动物生长过程中扮演重要角色。该基因家族在哺乳动物有3个成员Runx1、Runx2、Runx3，它们的产物都是由α和β亚单位构成的异二聚体［2］，具有不同生物学功能，Runx1与造血功能有关，Runx2是重要的骨生成调节因子，Runx3对脊神经节的神经发育及胃黏膜上皮细胞的增生调控和T细胞的分化起重要作用［1，3］。

　　Runx3（Runtrelatedtranscriptionfactor3gene）基因位于人染色体的1p36.1，基因全长约67kb，含有P1和P2两个启动子，6个外显子和1290bp的开放阅读框，内含子1跨越了整条基因全长的一半（35kb）。两个启动子区域均含数个分离的转录起始点，其中Runx3mRNA主要来自于P2启动子的转录［3］。两个启动子的GC含量不同，P2启动子GC含量高（64％）。在外显子2相当于启动子P2的位置和外显子6的起始部位有两个大CpG岛［4］。

　　人类Runx3蛋白是α、β两个亚单位构成的异二聚体，包含415个氨基酸残基，α亚单位含有一个RD（Runtdomain）保守域，RD位于Runx蛋白的氨基酸末端，由128个氨基酸组成，介导Runx蛋白与DNA结合以及蛋白质之间的相互作用［5，6］。α亚单位介导RD与靶DNA结合，β亚单能增强RD与靶DNA的结合力［7］。

　　Runx蛋白的羧基端富含脯氨酸和丝氨酸，对基因的转录调控起重要作用［2，7］。

　　2.1Runx3与胃黏膜的关系Li等［1］研究发现敲除Runx3（Runx3-/-）的小鼠胃黏膜明显增厚，Runx3-/-小鼠培养细胞对TGF-β诱导的生长抑制和凋亡作用不敏感，且Runx3-/-小鼠胃组织中半胱天冬酶3（caspase3）无活性［1］。Fukamachi等［8］研究发现Runx3缺失时胃黏膜细胞处于低分化状态。这些观察表明Runx3是胃黏膜上皮主要生长调控因子，是胃上皮细胞中重要的致凋亡因素。

　　2.2胃癌中Runx3表达情况研究发现，胃癌中Runx3的表达明显下调或缺失。Li等［1］应用RT-PCR、Southernblot和原位杂交方法对15株胃癌细胞系和46例胃癌组织标本的Runx3mRNA表达进行检测，结果发现47%的胃癌细胞系中Runx3无或低表达;60.9%的胃癌组织中Runx3无表达或低表达，Runx3的表达率与胃癌临床分期呈负相关。所以认为Runx3基因与胃癌的发生、发展有着极其密切的关系，并且随着胃癌分期的增高表达进一步降低。Osaki等［9］应用Western印迹法分析了6株胃癌细胞系Runx3蛋白质的表达情况，结果50%的细胞系Runx3表达阳性，与Li等报道的结果基本一致;此外，还通过免疫组化法揭示83例正常胃黏膜组织均有Runx3表达，而对应的肠上皮化生组织和癌组织中均无Runx3表达［9］。

　　2.3Runx3与胃癌的相关性Li等［1］报道Runx3-/-、p53-/-小鼠胃黏膜培养细胞能建立裸鼠种植肿瘤（腺癌），而Runx3+/+、p53-/-小鼠胃黏膜上皮培养细胞则不能，这表明Runx3功能缺失可能诱导了胃癌的发生。Guo等［10］以胃癌细胞系（Runx3-/-）作为感受态细胞，将外源性Runx3基因分别转染克隆体，结果显示，Runx3高表达克隆组细胞生长抑制最明显，Runx3低表达组次之泛亚电竞，说明Runx3的表达量与胃癌细胞的生长曲线成负相关。Sakakura等［11］研究发现胃癌原发灶和腹膜转移灶Runx3mRNA表达较正常胃黏膜明显下调，尤以腹膜转移灶下降程度最著。将转染外源性Runx3的胃癌细胞系注入裸鼠腹腔，结果转染组腹腔内极少有种植结节，而无转染对照组动物腹腔内有大量的、明显的种植结节形成。因此认为Runx3基因的失表达与胃癌的腹膜转移发生有关。Wei等［12］揭示胃癌组织中Runx3表达水平与患者的生存期密切相关。Peng等［13］通过对120例胃癌组织中Runx3表达与血管内皮生长因子（VEGF）表达的相关分析，揭示Runx3的转录可能与胃癌组织中VEGF的表达下调有关。因此Runx3基因沉默可能会加速胃癌的生长和远处转移。

　　2.4Runx3抑癌机制Runt区域转录因子与TGF-β超家族成员共同介导一些重要的生物学效应。TGF-β与其跨膜受体Ⅰ和Ⅱ（TβRⅠ和TβRⅡ）结合，产生受体异四聚体复合物（TβRC），从而发挥细胞内生物效应［14］，此过程中Smad蛋白起重要的作用。TGF-β信号转导通路的配体、受体和胞内信号转导分子Smad蛋白共同组成一个抑制肿瘤信号的通路。通路异常即可引起信号紊乱，促进多种肿瘤的发生和发展［15］。Runx3蛋白是TGF-β信号通路下游的一个转录因子，Runx蛋白与DNA结合，在TGF-β/BMP（bonemorphogeneticprotein）信号传导中起重要作用。只有在Runx蛋白的参与下，Smad复合物才能从细胞质内转入核内的功能靶点，与Runx蛋白共同转录激活靶基因，从而对细胞的分化、周期调控、凋亡和恶性转化起作用［16］。当Runx基因表达受抑制时，影响TGF-β信号通路的转导，从而诱导肿瘤的发生。

　　Chi等［17］研究显示Runx3是p21基因的下游调控子，p21在细胞生长周期中有重要作用，其通过抑制周期素依赖性蛋白激酶（cyclin-dependentKinase，CDK）表达而使细胞周期停滞于G1期。p21启动子包括5个Runx结合位点，即3个完全匹配的a、b、c位点和2个部分匹配的d、e位点，当Runx结合域突变时，p21启动子的活性明显降低，而Runx3和Smad3协同表达时p21启动子被激活，从而使细胞对TGF-β反应增强。Runx3的抑癌活性与其诱导p21表达的能力相关，p53也是通过调控p21表达活性来调节细胞生长周期，故两者作用机制类似，但作用的信号通路不同。最近有研究显示恢复Runx3表达可导致cyclinD表达下调，相反p27和caspase3、7和8则表达上调。这可能是Runx3诱导凋亡的潜在机制［14］。

　　因此，Runx3抑癌机制主要通过TGF-β信号通路协同Smad蛋白激活p21调节细胞生长周期，并通过下调cyclinD表达和上调p27和caspase3、7和8的表达而诱导凋亡。

　　3.1Runx3基因突变与表达基因突变是抑癌基因沉默的主要机制之一，然而文献报道突变不是Runx3表达下调的主要机制［1，12，18］。

　　3.2Runx3基因杂合性缺失与表达Li等［1］应用荧光原位杂交技术（FISH）对15个胃癌细胞系和46例胃癌组织Runx3DNA倍体进行分析，结果发现20%的胃癌细胞系和30%的胃癌组织中的Runx3为异倍体。并采用RT-PCR方法和原位杂交方法分别对这些发生杂合缺失胃癌细胞系和胃癌组织标本进行Runx3mRNA表达的检测，发现除1例胃癌组织可以检测到Runx3mRNA表达外，其余均无Runx3mRNA表达。22例Ⅰ期胃癌中有3例Runx3存在杂合缺失，2例Ⅱ期胃癌没有发现杂合缺失，14例Ⅲ期胃癌中3例Runx3存在杂合缺失，8例Ⅳ期胃癌中Runx3全都发生杂合缺失变化，说明Runx3的杂合缺失是胃癌中Runx3失活的原因之一，并且Runx3的杂合缺失和胃癌的分期有关。

　　3.3Runx3甲基化是胃癌中Runx3表达下调的主要原因启动子异常甲基化在基因表达调控、DNA修复、基因稳定及基因抑制方面起重要作用。Runx3启动子P2区域有一个典型CpG岛，理论上说明DNA甲基化可调控P2的转录。

　　Li等［1］揭示Runx3低表达或失表达都与Runx3启动子P2区域CpG岛过甲基化有关。Guo等［10］用N2甲基2N2亚硝基脲诱导鼠胃癌，从中建立4株胃癌细胞系，结果仅一株细胞系有微量的Runx3mRNA表达，其他3株细胞系均无Runx3mRNA表达，这3株Runx3基因沉默细胞系在Runx3启动子区域亦存在明显甲基化，所有细胞系经过DNA甲基化转移酶抑制剂52氮唑22脱氧胞苷（deoxycytidine，AZA）、组蛋白去乙酰酶抑制剂曲古抑菌素（trichostatin，TSA）共同处理后均恢复了Runx3表达。Waki等［19］检测了10株胃癌细胞系、93例胃癌组织及相应正常胃黏膜组织Runx3基因启动子甲基化状态，结果7株胃癌细胞系、42例胃癌组织和7例正常胃黏膜组织存在甲基化。此外，对19例尸检的正常胃黏膜组织Runx3甲基化状态进行检测，其中3例存在甲基化，但年龄均≥77岁，提示除高龄患者外Runx3甲基化几乎是癌特异性的。Kim等［20］对75例胃癌和各种胃癌前期病变组织（胃腺瘤77例、慢性胃炎伴肠上皮化生32例和慢性胃炎不伴肠上皮化生99例）Runx3甲基化状态进行检测，结果发现在胃癌组织中Runx3甲基化发生率为64%，而在各种胃癌前期病变组织中也存在不同程度的Runx3甲基化，其中胃腺瘤27.3%、慢性胃炎伴肠上皮化生28.1%和慢性胃炎不伴肠上皮化生8.1%。而在有腹膜转移的胃癌标本100%发现Runx3甲基化［11］。因此认为Runx3甲基化发生随癌前期病变向癌的方向发展而增加，从原位癌到进展期胃癌Runx3甲基化率随之升高，说明Runx3甲基化从胃癌的发生到胃癌的发展都有很重要的意义。Homma等［21］发现，大多数胃癌细胞系（90%）、胃癌组织（96%）和配对的正常胃黏膜组织（96%）均存在Runx3基因5′端CpG岛的甲基化，而在被视为导致基因沉默的关键部位——转录起始点附近区域的甲基化发生率较低，分别为40%、53%和11%。因此认为，Runx3基因高甲基化起初发生在5′端CpG岛，进而向转录起始点区域扩展，最终导致Runx3mRNA失表达，Runx3基因CpG岛多区域甲基化状态检测对胃癌的诊断及风险评估具有重要意义。

　　Runx3作为一个新发现的抑癌基因，在调控细胞生长、发育、凋亡和以细胞的信号传导及其他生物学效应方面有着重要的转录调节作用。其启动子P2区域CpG岛的过甲基化和杂合缺失是Runx3基因沉默的主要机制。Runx3的转录失活或表达下调可致胃黏膜上皮细胞的过度增生和分化异常，进而参与胃癌的发生和发展过程。Runx3有望成为一个恶性肿瘤，特别是胃癌发生发展的生物学标记物和肿瘤基因治疗的靶点（如Runx3基因的导入、逆转甲基化治疗等），有可能为胃癌等恶性肿瘤的诊疗提供新的策略和方案。

　　18曾超，贺修胜，罗桥，等.RUNX3基因在胃癌中的表达及其表达下调机制.世界华人消化杂志，2006，14（3）:250-255.

　　【关键词】 逆转录聚合酶链反应 western blot检测 双荧光素酶报告基因分析

　　ezrin蛋白是erm (ezrinradixinmoesin)家族成员之一, 主要参与细胞骨架与胞膜之间的连接 [1]。研究证明，ezrin基因在食管癌、胰腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌以及其他多种肿瘤细胞中过表达[26]。分析ezrin基因的外显子、内含子以及转录起始位点上游3 000 bp以内的dna序列，结果发现，ezrin基因转录起始位点上游约1 600 bp的范围为高gc含量区，存在cpg岛，且含有转录因子sp1的众多潜在结合位点。然而，ezrin基因在肿瘤细胞中的表达是否受到cpg岛甲基化或转录因子sp1的调控，调控位点又在哪里？这些问题迄今仍不明确。本研究对我们实验室现有的几种癌细胞进行ezrin基因表达检测，同时克隆ezrin基因5′侧翼高gc含量区序列，检测此序列在癌细胞中的转录活力，为进一步揭示ezrin基因在癌细胞中的表达调控机制奠定基础。

　　食管癌sheec细胞株为本实验室建立[7]，其余细胞株购自中国科学院细胞库。

　　trizol试剂、199培养基、dmem培养基购自invitrogen公司；限制性内切酶、逆转录系统试剂盒、pcr mix、双荧光素酶报告基因分析系统购自promega公司；pvdf膜购自millipore公司；ezrin ab1（3c12）购自neo markers公司；βactin抗体（ac15）购自sigma公司；标准蛋白分子量（sc2035）、羊抗鼠igghrp（sc2031）、化学发光试剂购自santa cruz公司。superfect转染试剂、质粒提取试剂盒购自qiagen公司。其他常用试剂为国产分析纯试剂。

　　所有细胞均置于37℃、5％co2、饱和湿度的培养箱中培养。ec109（食管癌）、ec171（食管癌）、ec8712（食管癌）、sheec（食管癌）、bgc823（胃癌）、hela（宫颈癌）等细胞贴壁生长于含10%灭活小牛血清的199培养液中；n87（胃癌）、a549（肺癌）、95d（肺癌）、hepg2（肝癌）等细胞贴壁生长于含10%灭活小牛血清的dmem培养液中。贴壁细胞培养成单层后，用0.25%胰蛋白酶（含0.02% edta）消化，传代培养，待达到一定数目[（1～2)×107]后收获细胞。k562（髓性白血病细胞株）细胞悬浮生长于含10%灭活小牛血清的rpmi199培养液中，细胞密度保持在(0.1～0.5)×106 cells/ml，每3天传代一次，当密度达到(1.0～1.5)×106 cells/ml时收获细胞。

　　需要进行瞬时转染实验的细胞接种于96孔培养板中，每孔100μl，细胞接种密度为2×105 cells/ml。细胞置37℃培养，细胞满度约为50%～60％时，转染质粒。

　　提取质粒并测定其含量。用buffer eb（qiagen公司质粒提取试剂盒中提供）将实验质粒pglb、pglp、pglbhe(-1444/+134)稀释至100ng/μl，内参照质粒prltk稀释至20ng/μl，然后将实验质粒分别与prltk按50∶1混合，即1μg∶0.02μg。具体转染步骤参照superfect转染试剂操作手册进行。转染后48h后，收获细胞。每组实验样品3个平行实验孔，并至少进行3 次重复实验。

　　参照双荧光素酶报告基因分析系统操作手册，在td20/20照度计（turner designs公司）上进行双荧光素酶活性检测。根据td20/20型照度计配置的软件包计算出各组转染细胞的相对荧光素酶活性（萤火虫荧光素酶/海肾荧光素酶），以此代表实验质粒启动子的转录活力。各组实验数据均计算平均值及标准差。应用ssps13.0软件对各组实验数据之间差异是否有统计学意义进行t检验。

　　rtpcr扩增ezrin基因片段的长度为105bp，扩增gapdh片段的长度为226bp。电泳结果显示，在所检测的食管癌等11种癌细胞中均有两条特异性扩增条带，且条带位置与预期相符，阳性率为100%。利用fluorchem tmis8900成像系统分析扩增条带的灰度值。gapdh为看家基因，在各种组织和细胞中的表达相对稳定，以gapdh的扩增产物作为对照，计算各细胞ezrin基因与gapdh基因扩增产物的比值，将食管癌细胞ec109的ezrin/gapdh灰度比值定义为1，其他癌细胞与ec109比较。可以看出，与已经被证实高表达ezrin基因的ec109相比，所检测的其他几种癌细胞ezrin基因mrna的表达水平在0.77～1.07之间，见图1。

　　ezrin蛋白分子量为82 kda。βactin是肌动蛋白的一种，分子量为42kda，在各种组织和细胞中的表达相对稳定，在此作为内对照。细胞总蛋白western blotting检测结果显示，在所检测的几种癌细胞中均有ezrin蛋白表达。利用fluorchem tmis8900成像系统分析蛋白条带，计算各癌细胞ezrin和βactin的灰度比值，将食管癌细胞ec109的ezrin/βactin比值定义为1，其他癌细胞与ec109比较。可以看出，与ec109相比，所检测的其他几种癌细胞ezrin蛋白的表达水平在0.79～1.32之间，见图2。

　　含有ezrin基因-1444/+134序列的重组质粒pglbhe(-1444/+134)的kpnⅰ/hindⅲ双酶切鉴定结果显示，重组质粒所连接的外源片段长度与预计值一致。质粒测序结果也证实所克隆序列为ezrin基因5′侧翼区序列（genbank登录号：ef184645），见图3。

　　质粒pglb、pglp和pglbhe(-1444/+134)分别与内参照prltk共转染ec109、hela、a549和bgc823细胞。以含sv40启动子的质粒，pg4的相对荧光光素酶活性为1来计算同一细胞系中pglb和pglbhe(-1444/+134)的相对酶活性。结果显示，在所检测的几种癌细胞中，不含启动子序列的pglb基本不表现荧光素酶活性（相对值为0.01～0.03）；以ezrin基因-1444/+134序列作为启动子的pglbhe(-1444/+134)表现出较强的荧光素酶活性，是pglp的4～10倍，见图4。这说明，ezrin基因的-1444/+134序列在癌细胞中具有很强的转录活力，有可能是调控ezrin基因转录的重要区域。

　　ezrin蛋白是一种磷酸化蛋白质，主要表达于各种类型的上皮细胞及某些非上皮细胞，具有广泛的生理功能。我们曾研究发现[2,8]，ezrin基因在永生化食管上皮细胞恶性转化为食管癌细胞过程中显著异常过表达，通过rnai手段下调ezrin基因的表达可以有效阻止食管癌细胞的移动、侵袭等肿瘤细胞生物学行为，在临床食管癌组织中发生明显的ezrin蛋白移位表达现象，提示ezrin是食管癌转移侵袭相关基因。

　　ezrin基因5′侧翼区存在cpg岛和转录因子sp1的众多潜在结合位点，为了明确ezrin基因的表达是否受其5′侧翼区序列调控，我们首先检测了实验室现有几种细胞株的ezrin基因表达情况，结果发现，ezrin基因在所检测的几种癌细胞中均有高水平表达。由于没有明显低表达ezrin基因的细胞株，甲基化实验暂时无法进行，不能确定是否存在5′侧翼区cpg岛甲基化调控ezrin基因的表达。然而，-1444/+134序列的报告基因检测结果显示，ezrin基因5′侧翼区序列具有很强的转录活力，很可能对ezrin基因在癌细胞中的高表达起重要作用。近期，我们针对ezrin基因在食管癌细胞中的转录调控进行了深入研究，结果发现，在ezrin基因-1444/+134序列中含有增强子区和基本启动子活性区，对基本启动子活性起重要调控作用的元件包括一个经典的sp1结合位点（-75/-69）和一个经典的ap1结合位点（-64/-58）。过表达cfos能够提高ezrin基因基本启动子活性；sp1特异性化学抑制剂mithramycin a能够阻断白因子与含有sp1位点的dna序列的结合，同时降低ezrin基因基本启动子活性。我们认为在食管癌细胞中，转录因子sp1和ap1共同调控ezrin基因的基本转录活性（另文发表）。ezrin基因在其他癌细胞中是否具有相同的转录调控机制，还需进一步研究。

　　在计算机基础与应用的实践教学中，案例教学法是经常使用的也是非常契合该课程特点的一种方法。将知识点隐含到案例中，通过案例中问题的解决达到掌握知识、提高能力的目的。案例选择应该具有典型性、针对性、实用性、综合性和启发性。典型性是指案例中的知识点要具有典型性、案例的应用要具有典型性，能够从该案例中推广到某一类问题的解决和应用。针对性是指案例中隐含的知识点是有侧重的，是针对某些知识点的掌握和应用的。实用性是指案例来源于实际生活，是能够真正运用于实际生活中问题的解决的。综合性是指案例中隐含的知识点不是单一的，而是隐含着若干相互联系又相互独立的知识点的，通过对案例中问题的解决，学员获得的是对知识点综合掌握的能力，是综合运用知识解决问题的能力。启发性是指案例能深刻启发学员思维，是能激发学员独立思考能力的，是激励学员自主学习、独立探究行为的，是能够启发学员对知识点进行归纳总结和对知识进行建构的。

　　教员在课堂以外的教学准备中精心挑选案例。在Excel的综合练习实践教学中，选择一个从实际生活来的问题作为案例。为了便于行政管理，某单位引入了指纹打卡系统，人员的打卡数据经过采集后会形成一个打卡记录的Excel文件，图1中给出了该文件的部分打卡记录。该案例具有典型性特点，对于这一类问题具有代表性。该案例具有针对性，是针对排序、函数使用、数据筛选以及分类汇总等知识点的强化练习。该案例素材文件来源于工作和生活，具有很强的实用性，是真正解决工作和生活中的实际问题。该案例也具有很强的综合性，是多个知识点的灵活运用。该案例还具有很强的启发性，其中问题的最终解决不是简单一步就能完成的。另外，该案例不同于一般案例知识点的考查，它把若干知识点隐含其中，需要经过逻辑分析才能理清问题解决的思路和步骤。案例本身的选择对于实践教学成功是至关重要的，该案例的选择为学员综合掌握Excel相关知识，并真正运用于实际问题的解决提供了重要的依托。打卡记录Excel文件，作为实践教学中的素材文件分发给学员，要求学生根据素材文件和给定的规则进行相关统计。具体要求：在一段时间内根据收集来的打卡记录Excel文件和具体的有效打卡统计规则统计每个人的有效打卡总次数。有效打卡次数的统计规则为：

　　（2）上午08：30之前打卡，为正常打卡签到，在这段时间内多次打卡，仅算1次有效打卡次数。

　　（3）下午16：00（含）之后打卡为正常打卡下班，在这段时间内多次打卡，也仅算1次有效打卡次数。

　　（4）其他打卡时间打卡均为无效打卡。该案例电子素材文件和按规则统计每个人的有效打卡次数的要求构成了该Excel综合案例。

　　在案例选择和确定与案例相关的基本素材之后，教员分发案例相关资料。同时，教员给学员布置实习任务，如果你是单位的打卡记录管理人员，你该如何做？这样，学员身临其境，角色身份发生了变化，自然引入了情境教学法。杜威认为，有有趣事情可做的真实情境会在很大程度上激发参与者的兴趣、主观能动性，角色的扮演，则增加了参与者的责任感、目的性。实验任务是基于案例基础上的，教员引导学员明确实验任务的具体要求，这就相当于审题，读懂题目要求。只有明确要做什么，目前拥有什么素材文件，才可以进行实验。

　　该案例具有深刻的启发性，需要对案例进行深入的分析，经过一步步的从外到里的剖析，才能逐渐接触到问题的本质，获得解决问题的方法。当把实验任务布置给学员后，一开始学员有些不适应，不知道如何下手，当教员告诉学员该案例的实施用到的都是原来学过的知识的时候，学员呈现出茫然和不解的表情，这时，作为教员要启发学员思维，不断引导学员自主学习、独立思考和独立解决问题。从观察案例素材出发，教员引导学员发现并思考第一个问题：

　　（1）在原始数据收集中，会出现完全相同的记录（行都相同），如何去除重复记录？去除重复记录是在该案例实施中首先要解决的问题，由于数据收集本身的原因，在形成Excel文件后出现重复记录，如果不把重复记录去除，会出现重复统计打卡次数的情况。如何能让Excel去除重复记录呢？教员需要启发学员，如果能够按照关键列“职工编号”和“打卡日期”进行排序，那么就会让可能的重复记录连续出现，这时就可以使用递推的方法。如果能够判断后一条记录和前一条记录中所有字段（列）的数值都相等，就可以认为这两条记录是重复的，这样的判断规则贯穿整个记录，可以判断出哪些是“重复”的记录了。“排序”这个知识点很简单，学员很快就做了出来，剩下的是如何判断重复记录了，“如果满足什么条件就怎样”，教员启发学员这需要用到Excel中的什么函数呢？有些学员已经兴奋地回答“可以使用IF函数”。这时教员进一步启发学员这个IF函数如何写，在什么位置写。通过不断的启发已经越来越接近这个子问题解决的核心了，学员们陷入了深思，教员点几名学员到黑板上写出自己思考的方法。经过几番修改，学员写出了正确的函数：“=IF（AND（B1=B2，D1=D2，E1=E2），”重复”，”不重复”），并把该函数写在F2的位置上，然后拖动填充柄复制公式直到最后一行。至此哪些是重复记录都通过函数显示了出来。随后教员再次启发学员，如何找出“不重复”的记录，作为下一步的数据呢？学员在头脑中迅速地查找已学的知识，很快就使用了“数据筛选”，把不重复的记录筛选出来，并把筛选出来的记录拷贝到了sheet2工作表中，作为下一步操作的数据。教员进一步启发学员考虑第二个问题：

　　（2）“打卡时间”列（E列）中不同的打卡时间在同一单元格中用“；”隔开，如何把它们分开到独立的列中以方便处理数据呢？教员引导学员观察E列中数据的特点，所有的时间数据是用“；”隔开的，使用Excel什么功能可以分开呢？有的学员马上提出，学过“数据分列”知识点，在这里很适用。当教员肯定了这个想法后，学员们都迫不及待地在计算机上操作了起来，并成功地完成了数据分列。在此基础上，教员启发学员考虑第三个问题：

　　（3）如何计算一条记录（行）中，打卡时间在8：30之前的打卡次数，打卡时间在16：00（含）之后的打卡次数？（提示：使用哪个函数）既然“数据分列”完成，打卡时间独立地显示在了各个单元格中，问题转化为了计算在打卡时间区域满足给定条件的单元格的数目。学员很快反应到这正是讲过的COUNTIF函数可以实现的功能，教员给予充分的肯定和鼓励，学员很快用COUNTIF函数找出了该问题的答案。在L2和M2单元格中输入公式“=COUNTIF（E2：J2，“8:30”）”和“=COUNTIF（E2：J2，“=16:00”)”，并向下拖动填充柄泛亚电竞，这样分别在L列和M列计算出了“上午规定时间内打卡次数”和“下午规定时间内打卡次数”。至此，虽然问题仍然没有得到解决，却越来越接近解决问题的核心了，大家都看到了问题最终解决的希望，学员全神贯注地思考下一步该如何做，教员再次启发学员，“目前我们用COUNTIF函数计算出来的是我们要的最终结果吗？不要忘记如果在上午或者下午有效打卡时间内多次打卡，那么上午或者下午的有效打卡次数仅算一次”，因此，就有了如下的第四个问题：

　　（4）上午08：30之前打卡次数如果大于1，如何令上午有效打卡次数记为1。下午16：00（含）之后打卡次数如果大于1，如何令下午有效打卡次数记为1。（提示：使用哪个函数）教员启发学员，又碰到了“如果满足条件，就怎么样”的问题了，学员们非常兴奋地说了“用IF函数”。的确，在这个案例中，再一次用到了IF函数，分别在N2单元格和O2单元格中分别写入函数“=IF（L21，1，L2)”和“=IF（L21，1，L2）”，并拖动向下填充柄填充其他单元格，以求出“上午有效打卡次数”和“下午有效打卡次数”。最后在P列使用简单的Excel公式中的加法运算就可以求出“一天有效打卡次数”了。每个人在不同日期的一天内的有效打卡次数终于在教员的层层启发下计算出来，最后一个问题抛出：

　　“Android设备管理器”无法管理已关机和离线的设备，也就是说只有在设备联网时，“Android设备管理器”才能定位该设备以及让该设备响铃或删除设备中的数据。然而在设备关机或离线时，可以预先在“Android设备管理器”上选择清空设备的数据。这样，在目标设备开机恢复网络连接时，“Android设备管理器”将会删除其中的数据。

　　启用设备管理器 通过“Google设置Android设备管理器”选中“远程定位此设备”和“允许远程恢复出厂设置”，并通过“Google设置位置信息”选中“使用位置信息”，这样就可以完成设备端的设置并开始使用设备管理器了。

　　注意：“Google位置信息设置”可能提示“位置报告”、“位置记录”功能“无法在此国家/地区使用”，但实际上并没有问题。

　　登录设备管理器 在https：///android/devicemanager上使用与目标Android设备关联的Google账户登录，设备管理器将询问是否允许使用位置数据。如果与该账户相关联的设备关闭了“Android设备管理器”的相关设置，那么设备会收到启用的提示。

　　定位并标识设备 系统定位设备后将在地图上标识该设备的大致位置，同时显示定位到该设备时的时间地点以及设备最后的使用时间。如果当前Google账户关联的设备不止一台，则可以通过设备名称右侧的箭头选择目标设备，点击右侧的铅笔状“修改”图标可以重命名设备。

　　让设备响铃5min 选择设备之后，可以在下方选择“响铃”或者“清空”，“清空”也就是将设备恢复到出厂设置，永久删除设备上的全部数据。“响铃”是让设备以最大音量响铃5min的时间，即使该设备已设置为静音或振动模式也可以响铃。因此，在忘记手机放到什么地方时也可以利用该功能将其找到。